En la visceral, los amastigotes se encuentran en aspirados de médula ósea, biopsia de bazo e hígado En la cutánea se realizan raspado, biopsia, improntas y extendidos de las lesiones y ganglios linfáticos. El amastigotes presentes es escaso, en lesiones de larga evolución, con reacción granulomatosa. La visualización de amastigotes se realiza al microscopio después de tinción con la técnica Giemsa, prueba de ELISA, inmunofluorescencia directa y la prueba de aglutinación directa, pacientes con hipergammaglobulinemia presentan títulos elevados de IgG e IgM. La intradermorreación de Montenegro, prueba de hipersensibilidad celular a antígenos de Leishmania es un método indirecto, utilizado en estudios epidemiológicos. para identificar entre especies se requiere un análisis de PCR.
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